Sắc ký cột cổ điển
2. Cột sắc ký (loại xoay)
3. Cột sắc ký (Hướng dẫn)
*** Bảng giá cho toàn bộ ở trên, yêu cầu chúng tôi nhận được
Mô tả
Thông số kỹ thuật
Sắc ký cột cổ điểnlà một kỹ thuật phân tách cơ bản được sử dụng rộng rãi trong hóa học và hóa sinh để tinh chế và phân lập các thành phần từ hỗn hợp . Nó hoạt động theo nguyên tắc phân vùng vi phân của các chất giữa một pha ổn định trong một cột và một pha di động chảy qua nó.
Pha đứng yên, thường là chất hấp phụ rắn như silica gel hoặc alumina, được đóng gói chặt vào cột thủy tinh hoặc nhựa . Hỗn hợp mẫu được giới thiệu ở đỉnh của cột Tính chất hóa học của chúng, chẳng hạn như phân cực, kích thước và ái lực với chất hấp phụ .
Các hợp chất có tương tác mạnh hơn với pha tĩnh di chuyển chậm hơn qua cột, trong khi các hợp chất có tương tác yếu hơn đi nhanh hơn . sự di chuyển khác biệt này dẫn đến việc tách hỗn hợp thành các dải hoặc phân số riêng biệt, có thể được thu thập riêng lẻ .}}}
Nó được định giá vì tính đơn giản, tính linh hoạt và hiệu quả chi phí của nó ., nó phù hợp cho cả hai phân tách quy mô phân tích, để xác định và định lượng các thành phần, và chuẩn bị cho các hoạt động lớn hơn. Phạm vi rộng của các ứng dụng .
Tham số
Nguyên tắc cơ bản
|
|
Sắc ký cột cổ điển, còn được gọi là sắc ký rắn lỏng, là một kỹ thuật để phân tách các chất hòa tan dựa trên sự khác biệt về phân phối giữa một pha đứng yên (thường là chất hấp phụ rắn) và pha di động (dung môi). Bằng cách sử dụng các hệ số phân phối khác nhau giữa pha cố định và pha di động . Trong sắc ký cột, pha đứng yên thường bao gồm vật chất hạt xốp (như silica gel, alumina, carbon hoạt hóa, v.v. Các phân tử chất tan từ giai đoạn đứng yên và lựa chọn của nó phải được xác định theo độ phân cực của chất tan và đặc tính hấp phụ của chất hấp phụ .}}}}}}}}}}}}}} Trong quá trình phân tách, dung dịch hỗn hợp được đưa vào cột chứa pha tĩnh . với luồng của pha di động, các thành phần di chuyển xuống cột ở các tốc độ khác nhau do khả năng hấp phụ khác nhau của pha {{1} Thành phần có độ phân cực yếu dễ dàng được mang đi bởi pha di động và tốc độ di chuyển nhanh hơn . Theo cách này, mỗi thành phần tạo thành một số dải màu trên cột để đạt được sự phân tách .} |
Phân tích axit amin
Phân tích axit amin thường được thực hiện bằng phương pháp sắc ký lỏng, trong đóSắc ký cột cổ điểnlà một kỹ thuật thường được sử dụng . Trong phương pháp này, nhựa trao đổi ion được sử dụng làm pha tĩnh để tách axit amin theo sự khác biệt của điện tích . axit amin có thể được chuyển đổi thành một dạng phân tách và giảm dần Cột sắc ký .
- Chuẩn bị mẫu: Mẫu protein được thủy phân thành axit amin . Điều này có thể đạt được bằng cách thủy phân axit hoặc thủy phân enzyme . Mẫu thủy phân cần phải trải qua quá trình xử lý trước, chẳng hạn như loại bỏ dư lượng protein {3}
- Đạo hàm: Để cải thiện độ nhạy của đặc điểm phân tích và phân tách axit amin, việc dẫn xuất axit amin thường được yêu cầu . .
- Lựa chọn cột: Chọn cột phù hợp để phân tích axit amin, chẳng hạn như cột trao đổi ion, cột C18, cột C8, v.v.
- Cài đặt điều kiện sắc ký: Đặt các điều kiện sắc ký thích hợp, bao gồm pha di động, tốc độ dòng chảy, chương trình độ dốc, v.v.
- Phân tích mẫu: Mẫu sau khi thủy phân và dẫn xuất được tiêm vào sắc ký để phân tích . bằng cách so sánh diện tích cực đại và nồng độ của từng axit amin trong mẫu trên đường cong tiêu chuẩn, hàm lượng axit amin trong mẫu có thể được phân tích định lượng .}}}
- Xử lý dữ liệu: Theo diện tích cực đại và dữ liệu nồng độ thu được từ phân tích, hàm lượng của mỗi axit amin trong mẫu được tính toán và dữ liệu được xử lý và kết quả được báo cáo .
Có nhiều ví dụ ứng dụng trong phân tích axit amin và một số trường hợp cụ thể được liệt kê dưới đây:
- Phát hiện các axit amin thiết yếu: Việc sử dụng có thể phát hiện hàm lượng của các axit amin thiết yếu, chẳng hạn như isoleucine, leucine, lysine, v.v.
- Xác định các axit amin trong y học Trung Quốc: Trong phân tích y học Trung Quốc, nó cũng được sử dụng rộng rãi để xác định hàm lượng axit amin trong y học Trung Quốc . Ví dụ, khi xác định hàm lượng paeoniflorin trong các loại thuốc Axit .
- Xác định axit amin trong thực phẩm: Hàm lượng axit amin trong thực phẩm cũng là một trong những khu vực ứng dụng quan trọng . Ví dụ, trong việc xác định nucleotide trong thực phẩm và sản phẩm sữa của trẻ sơ sinh, năm nucleotide trong sữa bột có thể được phân lập và xác định Được sử dụng để xác định hàm lượng axit amin trong các loại thực phẩm khác, cung cấp một cơ sở quan trọng để kiểm soát chất lượng thực phẩm và đánh giá dinh dưỡng .
Trong phân tích axit amin, cần phải chọn thuốc thử dẫn xuất và điều kiện dẫn xuất thích hợp để cải thiện độ nhạy và độ chính xác của phát hiện .
Việc lựa chọn cột và cài đặt của các điều kiện sắc ký có tác động quan trọng đến hiệu ứng phân tách và cần được tối ưu hóa theo mẫu cụ thể và nhu cầu phân tích .
Trong quá trình phân tích, cần phải chú ý đến các điều kiện chuẩn bị và lưu trữ của các mẫu để tránh ảnh hưởng của ô nhiễm mẫu và suy thoái đối với kết quả phân tích .
Điều trị phái sinh là gì
Đạo hàm là một kỹ thuật tiền xử lý mẫu quan trọng trongSắc ký cột cổ điển, nhằm mục đích cải thiện hiệu suất phát hiện và hiệu ứng tách của các phân tích . Sau đây là một lời giải thích chi tiết về quá trình dẫn xuất:
|
► Mục đích của điều trị phái sinh 1) Hiệu suất phát hiện được cải thiện: Bằng cách giới thiệu các nhóm chức năng dễ phát hiện, chất phân tích tạo ra tín hiệu mạnh hơn trên máy dò, cải thiện độ nhạy và độ chính xác của phát hiện . |
|
|
|
► Loại điều trị phái sinh 1) Đạo hàm tiền cột: |
|
Đạo hàm sau cột có những lợi thế của khả năng tái tạo tốt và các yếu tố ít ảnh hưởng hơn, nhưng nó đòi hỏi các dụng cụ và thiết bị bổ sung . 1) Độ nhạy phát hiện được cải thiện: Ví dụ, trong phân tích axit amin, việc giới thiệu các nhóm chức dễ phát hiện (như fluorophores) thông qua dẫn xuất trước cột có thể làm tăng cường độ tín hiệu của axit amin trên máy dò, do đó cải thiện độ nhạy của phát hiện .}}}}}}} |
|
Sắc ký cột cổ điển, một kỹ thuật nền tảng trong khoa học tách, tiếp tục phát triển với những tiến bộ trong vật liệu và phương pháp, đảm bảo sự liên quan của nó trong cả ứng dụng nghiên cứu và công nghiệp .
Một hướng đầy hứa hẹn là sự tích hợp của các giai đoạn cố định mới . trong khoa học vật liệu đã dẫn đến sự phát triển của các vật liệu đóng gói hiệu suất cao với tính chọn lọc, ổn định và hiệu quả.
Hơn nữa, nó ngày càng được kết hợp với các kỹ thuật phát hiện tiên tiến, chẳng hạn như phép đo phổ khối, để cải thiện độ nhạy và độ chính xác . Sự lai tạo này cho phép phân tích toàn diện hơn về hỗn hợp phức tạp, mở rộng khả năng ứng dụng của kỹ thuật trong các lĩnh vực như chuyển hóa và protein {
Tóm lại, tương lai nằm ở sự thích nghi với các vật liệu mới, thu nhỏ và tích hợp với các phương pháp phát hiện tiên tiến, đảm bảo tiện ích tiếp tục của nó trong cảnh quan khoa học và công nghiệp hiện đại .
Chú phổ biến: Sắc ký cột cổ điển, Nhà sản xuất sắc ký cột cổ điển Trung Quốc, nhà cung cấp, nhà máy
Một cặp
Sắc ký cột thông thườngTiếp theo
Sắc ký cột nhôm oxitGửi yêu cầu
